脱毒马铃薯种薯生产技术规程
1 范围
本规程规定了马铃薯脱毒苗的培育、繁殖、各级种薯的生产、扩繁栽培和各级脱毒种薯的检验、收获、贮藏的生产技术操作规程。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 18133 马铃薯脱毒种薯
GB/ T 31001 有关量、单位和符号的一般原则
GB 3102 量和单位
GB 7331 马铃薯种薯产地检疫规程
NY/T 1606 马铃薯种薯生产技术操作规程
DB/T 0028 马铃薯生产技术规程
3 术语和定义
下列术语和定义用于本标准
3.1 脱毒组培苗
简称脱毒苗，是应用茎尖组织培养技术获得的，经检测确认不带马铃薯卷叶病毒、马铃薯Y病毒、马铃薯X病毒、马铃薯A病毒、马铃薯M病毒或马铃薯S病毒等和马铃薯纺锤块茎类病毒的再生试管苗，经过组织培养方法大量扩繁的且不带上述病毒和类病毒用于生产原种的试管苗。
3.2 试管薯
脱毒苗经诱导培养，直接在试管（瓶）内结的小薯。
3.3 脱毒种薯
从繁殖脱毒苗开始，经逐代繁殖增加种薯数量的种薯生产体系生产出来的各级种薯。
脱毒种薯分为原原种、原种、生产用种薯。
3.3.1 原原种
用育种家种子、脱毒组培苗或试管薯在防虫网等隔离条件下生产，经质量检测符合GB 18133的，用于原种生产的种薯。
3.3.2 原种
用原原种做种薯、在良好隔离条件下生产的符合GB 18133质量标准的种薯。
3.3.3 生产用种薯
用原种做种薯，在隔离条件下生产出的符合一级种薯标准的种薯。
3.4 隔离栽培
指在与病虫害隔离的防虫网下进行的栽培方式。
3.5 扩繁栽培
指1克以上脱毒原原种直接种入大田，采取调节播种期、喷药防虫、剔除病、杂株等综合保护措施，生产脱毒原种的种植方式。
4 脱毒组培苗生产
4.1 脱毒组培苗的培育
4.1.1 选材
选用生产上主栽的优良品种块茎的休眠芽或刚出土幼苗的茎尖、或田间成株上的叶芽做茎尖剥离材料。
4.1.2 培养基的制备
按附录A在每1000毫升的MS培养基中加入GA3(0.2毫克)；6-BA（0.1毫克）；NAA（0.01毫克）。分装入瓶。
4.1.3 灭菌
在0.15Mpa/cm2压力下对培养基、操作工具等灭菌30分钟。
4.1.4 茎尖剥离接种
将入选材料放入纱布袋，先用自来水冲洗30分钟后，在无菌条件下，放入75%酒精中㓎5秒，再用0.1%升汞消毒5-10分钟，取出用无菌水冲洗3次，用灭菌滤纸吸干材料表面水分，在解剖镜下用手术刀等工具轻、准、快的剥去幼叶，切取带1-2个叶原基的生长点，迅速接入装有茎尖分化培养基的培养瓶中，每瓶放一个生长点，注明品种、接种日期等。
4.1.5 培养条件
日温25℃，夜温15℃，光照时数12小时/天，光照强度2000-3000lx条件下培养25天左右。
4.1.6 病毒检测
送国家法定质检部门与标准检测中心检测认定。
用于检测的数量不低于总数的10%，如果脱毒苗没有检测出马铃薯卷叶病毒、马铃薯Y病毒、马铃薯X病毒、马铃薯A病毒、马铃薯M病毒或马铃薯S病毒等和马铃薯纺锤块茎类病毒，则应批准进行组培苗生产，不合格的脱毒苗不得用于组培快繁。
4.2 脱毒组培苗快繁
4.2.1 脱毒组培苗来源
经4.1.6检测，去除所含上述病毒的组培苗。
4.2.2 培养基
用MS培养基。灭菌同4.1.3。
4.2.3 快繁
将脱毒苗剪切1厘米左右，带一叶一芽的茎段接种在继代培养基上，每瓶培养基上接种8个茎段。待茎段长成10厘米左右的小苗，进行转接。
4.2.4 培养条件
培养温度20±2℃，光照时数10小时/天，光照强度2500lx条件下培养一个月。
4.3 脱毒组培苗的保存
4.3.1 培养基
MS+ B9（10毫克/升）+甘露醇（40毫克/升）+琼脂（700毫克/升）+白糖（3000毫克/升）。灭菌同4.1.3
4.3.2 接种
选继代培养中生长健壮的组培苗，进行茎段扦插切段，每瓶接种20个。
4.3.3 培养
置弱光（1000lx）和较低的温度（5℃-10℃）下培养。
5 原原种的生产
5.1 隔离网室的建立
5.1.1 环境条件
选择四周无高大的建筑物、水源、电源、交通便利，通风透光的地方建网室。
5.1.2 <![endif]>建设要求
隔离网室用热渡锌管作支撑，网室内地表及网室四周内，应建成水泥地面，网室周围范围内不能有其他可能成为马铃薯病虫害侵染源或可能成为蚜虫寄主的植物。严防网室内地表积水和网室外水流入。用于隔离的网纱孔径要达到60目-80目。
5.2 播前准备
5.2.1 炼苗
将长到8片叶子，苗龄30天左右的组培苗打开瓶盖。炼苗3-5天。
5.2.2 基质
市场上购买的商品基质。
5.2.3 移栽
将试管苗根上的培养基清洗干净，每窝定株2棵，行距10厘米，株距10厘米。
5.3 播种
5.3.1 拱棚盖膜
试管苗移栽完后，轻细均匀洒水，使基质充分饱和吸水，及时拱棚盖膜，拱棚内相对湿度保持在95%。
5.3.2 施肥
从小苗生根成活后及时去掉拱棚，根据苗情喷施0.2%N:P:K=2:1:3的营养液3次。
5.3.3 浇水
勤浇、细浇、少浇，保持基质湿润，持水量在50%，收获前一周停止浇水。
5.3.4 病虫害防治
马铃薯原原种病虫害防治对象和方法按DB/ T 0028执行。
5.4 收获、包装、贮存
5.4.1 收获
根据茎叶三分之二变黄为成熟期，收获时避免机械损伤和品种混杂，收获摊晾5天，剔除烂薯、病薯、伤薯及杂物。
5.4.2 包装
包装采用尼龙网袋包装，按大小分级包装，做好标记，双标签，袋内袋外各一个，装袋不超过网袋容积的三分之二。
5.4.3 贮存
根据当地气候，种薯生产量、收获期，设备条件等，将种薯置于低温室内避光贮藏。贮藏的条件是低温3-5℃，相对湿度90%。
6 原种生产
6.1 选地
自然隔离条件良好，100米内无茄科作物种植，土壤疏松，肥力中等，排灌方便的砂壤土。
6.2 种薯准备
选用通过休眠、芽眼壮的原原种做种薯，播前2个月，将在专用贮藏库内贮藏的原原种取出，剔除烂薯、病薯后，置于25℃，有散射光的室内，让其自然通过休眠发芽，促芽变绿，大的种薯可按GB 7331切块执行。
6.3 播种
6.3.1 单行起垄种植
人工开沟，点薯、施肥、覆土连续作业，播种深度10厘米-13厘米。行距70厘米，株距20厘米。 1-20克薯种植密度为5000-6000株/亩，20克以上薯种植密度为4000-5000株/亩。
6.3.2 底肥
腐熟农家肥1500公斤/亩。
6.3.3 播种期
每年4月底5月初播种。
6.4 田间管理
6.4.1 追肥
齐苗后及时追施尿素5公斤/亩。
6.4.2 中耕培土
齐苗后第一次中耕锄草进行。7-8片叶子时第二次中耕，培土成低垄，现蕾期第三次中耕、培土成高垄,垄高为30-40厘米。中耕要浅,划破土皮,拔除杂草,避免切断匍匐茎。
6.4.3 浇水
根据墒情选择浇水，收获前一周停止浇水。
6.4.4 去杂除劣
现蕾至盛花期，及时拔除混杂植株，包括地下块茎。
6.4.5 病虫害防治
病虫害防治具体内容按照DB∕T 0028标准执行。
6.5 收获、包装、贮存
按原原种生产的收获、贮存及包装有关规定执行。
A附 录 A
（规范性附录）
MS培养基贮备液的配制
贮备液
|
成分
|
用量（毫克/升）
|
培养基取用量(毫升)
|
A
|
硝酸铵
|
33000
|
50
|
硝酸钾
|
38000
|
磷酸二氢钾
|
3400
|
硫酸镁
|
7400
|
氯化钙
|
8800
|
B
|
硫酸亚铁
|
5570
|
5
|
乙二胺四乙酸二钠
|
7450
|
C
|
碘化钾
|
660
|
5
|
钼酸钠
|
50
|
硫酸铜
|
5
|
氯化钴
|
5
|
硫酸锰
|
4460
|
硫酸锌
|
1720
|
硼酸
|
1240
|
D
|
盐酸硫胺素
|
20
|
5
|
盐酸吡哆素
|
100
|
甘氨酸
|
400
|
烟酸
|
100
|
肌醇
|
200
|
E
|
蔗糖
|
30000
|
|
琼脂
|
10000
|
00001注：在配置贮备液A时，最后加氯化钙,在配置贮备液B时，分别溶解硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠，溶解时候要一边加热一边搅拌，待两种溶液都溶解后再混合在一起，最后用蒸馏水定容到1000毫升。
